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鸿运国际内毒素蛋白Elisa试剂盒实验流程

发布时间:2025-03-10   信息来源:殷斌炎

本试剂盒只能用于科学研究,严禁用于医学诊断。该试剂盒用于内毒素(ET)检测的原理是基于双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被的adropin(AD)抗体微孔中,按顺序加入标本、标准品及HRP标记的检测抗体,经过温育和彻底洗涤后,使用底物TMB进行显色。在过氧化物酶的催化下,TMB转化为蓝色,随后在酸的作用下变为最终的黄色。颜色的深浅与样品中adropin(AD)的含量呈正相关。最后,利用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),以计算样品浓度。

鸿运国际内毒素蛋白Elisa试剂盒实验流程

样品收集、处理及保存方法如下:

1. 血清:采用不含热原和内毒素的试管,操作时需避免细胞刺激。收集血液后,进行3000转的离心10分钟,以迅速小心地分离血清和红细胞。

2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,进行3000转的离心30分钟并取上清液。

3. 细胞上清液:进行3000转离心10分钟,以去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水进行捣碎,并通过3000转离心10分钟获得上清液。

5. 保存:如样本在收集后未能立即检测,应按一次用量分装,存放在-20℃以避免反复冻融,解冻时需放在室温下,确保样品充分均匀解冻。

操作时需注意自备物品及相关事项。本试剂盒的组成包括标准品(S0-S5),其浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。

在试剂的准备方面,20×洗涤缓冲液需按1:20的比例稀释,即1份的20×洗涤缓冲液与19份蒸馏水混合。

为了绘制标准曲线,在Excel中以标准品浓度为横坐标,对应OD值为纵坐标,形成标准品的线性回归曲线,最后依据曲线方程计算各样本的浓度值。

免责声明:使用本试剂盒时请遵循相关操作指引,确保准确的实验结果。本品牌[鸿运国际]致力于提供高品质的生物医疗试剂,为研究提供可靠的支持。